Дисбактериоз
Дисбактериоз
Восстановление после применения антибиотиков
Лямблиоз
Исследование мочи
Спортивная Генетика
Лабораторная диагностика
Научно-популярная микробиология

Диагностика опухолевых и воспал заб. толстого киш.

МНОГОЭТАПНАЯ СИСТЕМА ДИАГНОСТИКИ ВОСПАЛИТЕЛЬНЫХ
И ОПУХОЛЕВЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ ТОЛСТОЙ КИШКИ


Бурцев Д.В., Максимов А.Ю., Ильяшенко М.Г., 3Тарасова Г.Н.

     Воспалительные заболевания кишечника (ВЗК) повышают риск развития рака толстой кишки, особенно если неспецифический язвенный колит длится более 10 лет. Недавние исследования показали, что болезнь Крона на 5–10 % повышает риск раковых заболеваний. Однако окончательно степень риска колоректального рака (КРР) при ВЗК еще не определена. Так, исследование, проведенное британскими учеными, охватывало 624 больных с воспалительными заболеваниями кишечника и выявило, что только у 3,5 % больных развился рак толстой и прямой кишки, хотя прогнозируемое количество было в 7 раз больше. Возраст пациентов, у которых был выявлен КРР после длительного течения ВЗК, в среднем составлял 41 год с колебанием в диапазоне от 20 до 74 лет. При этом рак прямой кишки
встречался в 22 % случаев при прогнозе 38 %. Вероятно, из множества факторов, влияющих на риск малигнизации при ВЗК, наиболее значимый – возраст больного.
     Считается, что длительность течения язвенного колита является следующим определяющим фактором возможности развития аденокарциномы толстой кишки. Рак чаще развивается у больных с панколитом (13 %), чем у больных с воспалением левой части поперечно-ободочной кишки (5 %). У последних рак развивается в среднем на 10 лет позже. В первые 10 лет ВЗК частота возникновения КРР составляет 1 % и в дальнейшем прогрессивно увеличивается до 7 % через 20 лет течения заболевания, до 16 % – через 30 лет и достигает 53 % через 40 лет. Пациенты с болезнью Крона имеют повышенный риск развития КРР, но при этом заболевании рак встречается реже, чем при язвенном колите. Задача своевременного выявления фоновых, предраковых и раковых заболеваний кишки с оценкой риска развития злокачественных заболеваний является актуальной в медицине. Ее разрешение позволит осуществить ряд профилактических мер для предупреждения развития КРР на фоне ВЗК.
    В связи с вышеизложенным целью нашего исследования явилось среди пациентов с положительном результатом теста на кровь в стуле выявить распространенность воспалительных и опухолевых заболеваний кишечника, оценить их взаимосвязь и диагностическую ценность лабораторного теста с кальпротектином.

Материалы и методы исследования


    Исследования были проведены на базе ГБУ Ростовской области «Областной консультативно-диагностический центр» с 2008 по 2011 г. На первом этапе скрининга больным проводили анализ кала на скрытую кровь с помощью фотометрического анализатора Sentifob и теста FOB Gold. Тест FOBGold позволял точно определить количественное содержание гемоглобина в кале без предварительного придерживания пациентами диеты. Метод основан на реакции агглютинации антиген-антитело между присутствующим в образце гемоглобином человека
и анти-гемоглобин-антитело на латексных частицах. Агглютинация измерялась как увеличение при абсорбции в 570 нм, единица которой пропорциональна количеству гемоглобина человека в образце. Данный тест является полностью автоматическим. Специальная пробирка для сбора образцов разработана как прибор для сбора и одновременно как гигиеничный и практичный контейнер для образцов, помещаемый прямо в биохимические контрольные приборы. 2462 пациента с положительным результатом теста на скрытую кровь в стуле направлялись на колоскопию. В результате проведения колоноскопии забирались биоптаты кишки для последующего гистологического анализа. Препараты окрашивали гематоксилином и эозином, проводили световую микроскопию.
   У больных с верифицированным диагнозом изучали сопряжение между ВЗК в анамнезе и развитием злокачественных новообразований толстой кишки. У больных с воспалительными и доброкачественными заболеваниями кишки определяли содержание фекального кальпротектина. Количественное определение содержания кальпротектина в образцах стула проводили иммуноферментным анализом (ELISA) с помощью стандартных наборов Buhlmann(Швейцария). Уровень кальпротектина при ВЗК оценивали в зависимости от клинической активности колита. Клиническую активность колита оценивали с помощью балльной шкалы D. Rachmilewitz(1989). Сумма баллов от 0 до 4 соответствовала ремиссии заболевания, 5–10 баллов – низкой, 11–15 баллов – средней и более 16 баллов – высокой степени клинической активности неспецифического колита. У пациентов с КРР и положительным анамнезом в отношении ВЗК дополнительно оценивали значимость уровня кальпротектина в отношении риска КРР с помощью логистического регрессионного анализа.
   Статистическую обработку результатов проводили с использованием компьютерной программыSTATISTICA 7.0 (StatSoft, США).


Результаты исследования и их обсуждение


    Среди больных с положительным результатом анализа на скрытую кровь в стуле по результатам гистологического исследования биоптатов кишки, полученных при колоноскопии, была выявлена структура воспалительных и опухолевых заболеваний кишки (табл. 1).

   В половине случаев при положительном результате теста на скрытую кровь среди пациентов выявлялись ВЗК: 2008 г. – в 50,2 %, 2009 г. – в 52,4 %, 2010 г. – в 47,5 %, 2011 г. – в 46,3 %. Злокачественные новообразования толстой кишки были выявлены в одной десятой случаев, – в целом за 2008–2011 гг. в 10,8 %. Доброкачественные новообразования кишки с дисплазией наблюдались у одной трети пациентов: 2008 г. – в 29,3 %, 2009 г. –
в 19,6 %, 2010 г. – в 23 %, 2011 г. – в 29,4 %. Среди 265 больных со злокачественными новообразованиями толстой кишки 32 (12,1 %) пациента указывали на ВЗК в анамнезе. Сопряжение между ВЗК и КРР было значимым, на что указывал коэффициент сопряжения Пирсона
132,6 (p < 0,001).
   Новым маркером, позволяющим дифференцировать органические и функциональные кишечные заболевания, является фекальный кальпротектин. Кальпротектин высвобождается из нейтрофилов и тканевых макрофагов во время их активации или гибели и вовлекается в активный воспалительный процесс. Кроме того, он обнаруживается в моноцитах и в илеальных эозинофилах. При иммунном ответе на воспалительный процесс в кишечнике с участием нейтрофилов кальпротектин высвобождается и затем выводится с калом в концентрации в 6 раз выше, чем в крови. Кальпротектин является стабильным химическим веществом и медленно разлагается протеазами микроорганизмов.
   В результате прямое обнаружение кальпротектина в кале проясняет степень воспалительного иммунного ответа в различных регионах ЖКТ. У здоровых людей «нормальные» уровни кальпротектина в стуле? 50 мг/г [7]. Значительно повышенные концентрации отмечаются при ВЗК, бактериальных инфекциях ЖКТ, дивертикулитах и онкологических заболеваниях, постоянном приеме нестероидных противовоспалительных средств. Содержание фекального кальпротектина (мкг/г) у больных с воспалительными и опухолевыми заболеваниями толстой
кишки отражено в табл. 2.

П р и м е ч а н и е. M ± m – cредняя выборочная и ошибка средней, Ме – медиана, – значения нижнего и верхнего квартилей, * – достоверные отличия по сравнению с больными с добро-
качественными опухолями при p < 0,001, · – достоверные отличия по сравнению с пациентами со злокачественными опухолями при p < 0,001.


      Средние концентрации кальпротектина в образцах кала у больных ВЗК составили 238,8 ± 5,7 мкг/г, что было существенно выше (p < 0,001) в отличие от аналогичных показателей пациентов с доброкачественными (78,9 ± 3,7 мнг/г) и злокачественными (95,5 ± 5,4 мкг/г) опухолями. При этом значимых различий концентраций кальпротектина у больных в состоянии ремиссии и у пациентов с опухолевыми образованиями кишки не наблюдалось. С повышением клинической активности ВЗК повышался и уровень фекального кальпротектина. Больные в основном были с умеренной активностью неспецифического колита. У пациенток с КРР и ВЗК в анамнезе уровень фекального кальпротектина был на
79,6 % (p < 0,05) выше по сравнению с больными КРР при отсутствии ВЗК в анамнезе. Проведение статистического анализа позволило установить достоверное влияние уровня фекального кальпротектина у больных ВЗК на риск развития у них КРР (?2 = 8,95, р = 0,003).  

      Графическая аппроксимация изучаемой зависимости отражена на рисунке, а математическая аппроксимация представлена функцией y = exp(–12,943 + (,129499)·x)/(1 + exp(–12,943 + (,129499)·x)), где у – риск КРР, а х – уровень фекального кальпротектина, мкг/г.

График логит аппроксимации зависимости риска КРР от уровня фекального кальпротектина у больных ВЗК

     Согласно установленной зависимости с повышением уровня фекального кальпротектина риск КРР у больных ВЗК повышался (табл. 3): при содержании маркера в калена уровне верхней границы нормы 50 мкг/г, риск КРР составлял 0,16 %, а при уровне 100 мкг/г, что в 2 раза выше нормы – 50,2 % и при 110 мкг/г повышался соответственно до 78,6 %.

Таким образом, маркер воспаления и структурных повреждений кишки кальпротектин предоставляет дополнительную информацию о риске КРР у больных ВЗК.

Выводы:


     1. У больных с положительным результатом теста на скрытую кровь в стуле в структуре заболеваний преобладают ВЗК (49,1 %), доброкачественные новообразования кишки с дисплазией наблюдаются в 25,1 %, злокачественные новообразования толстой кишки – в 10,8 %.
     2. У больных риск КРР сопряжен с наличием ВЗК в анамнезе и уровнем фекального кальпротектина, отражающего степень воспаления и структурных повреждений стенки кишки.





© 2009-2015 OOO «Лабораторные технологии»
Телефон/факс : +7 (342)291-21-91, 205-52-90
E-mail: labt1@yandex.ru